Saturs
- posmi
- 1. metode Tieši novēro baktērijas
- 2. metode Biomasas mērīšana
- 3. metode Turpināt ar turbidimetriju
Baktēriju augšanu var izmērīt vairākos veidos, un dažus no tiem īstenot ir grūtāk nekā citus. Parasti izmanto vienkāršākos un dod salīdzinoši precīzus rezultātus, ar nosacījumu, ka mērījumu laikā tie ir stingri. Visizplatītākās metodes ir baktēriju novērošana un skaitīšana, biomasas un sausās biomasas mērīšana un duļķainības noteikšana. Jūsu skolas laboratorijā jābūt aprīkojumam, kas nepieciešams vismaz vienai no šīm metodēm.
posmi
1. metode Tieši novēro baktērijas
-
Sagatavojiet aprīkojumu. Papildus tam, kas parasti atrodams visās bioloģijas laboratorijās, jums būs nepieciešami daži specifiski priekšmeti. Pārliecinieties, ka visi instrumenti un konteineri ir pa rokai, tāpēc jums nav jādodas atpakaļ un atpakaļ skapī, kur tiek glabāts aprīkojums. Iepriekš apdomājiet, ko darīsit, lai zināt, ko izmantosit katrā posmā. Jums būs jāzina arī daži galvenie termini.- Iegūstiet hemacitometru. Tas ir asmens ar numerācijas kamerām, kas saistīts ar mikroskopu. Tas ir ļoti viegls pielāgošanas un lietošanas instruments. Jūs varat atrast dažus no piegādātājiem, kas specializējas skolu un pētniecības laboratoriju aprīkojumā. Parasti tiek sniegta lietotāja rokasgrāmata.
- Paņem petri trauku. Šis ir mazs, apaļš, sekls trauks, kurā var novērot baktērijas.
- Termins "kultūra" attiecas uz mikroorganismiem, kas mākslīgi tiek pavairoti zinātniskā eksperimenta ietvaros.
- "Kultūras buljons" ir līdzeklis, kurā kultūra attīstīsies.
-
Izmantojiet Petri trauku. Ielieciet baktērijas kastē un novērojiet to mikroskopā. Varat arī ievietot to tieši uz slaida. Tad saskaita baktēriju šūnu skaitu. -
Pārliecinieties, vai koncentrācija ir pareiza. Ja baktēriju ir par daudz, tās pārklājas, un jūs nevarēsit tās pareizi saskaitīt. Ja tas tā ir, atšķaidiet kultūru, sajaucot to ar nelielu daudzumu buljona. Ja to ir par maz, rezultāts nebūs nozīmīgs. Pēc tam buljons jāfiltrē, lai palielinātu koncentrāciju. -
Saskaitiet baktērijas. Pēdējais solis ir vienkārši rēķināties. Apskatiet skaitīšanas kameras zem mikroskopa un atzīmējiet redzamo šūnu skaitu. Salīdziniet rezultātu ar citu līdzīgu pieredzi.
2. metode Biomasas mērīšana
-
Pārbaudiet, vai jums ir nepieciešamie instrumenti. Šī metode tiek lēni ieviesta, un tā ietver dārgu iekārtu izmantošanu. Ja jūs to nemazgājat, izmantojiet citu paņēmienu. No otras puses, ja laboratorijai, kurā atrodaties, ir piemēroti rīki, biomasas un sausās masas mērīšana ir ideāla, jo tā dod precīzus rezultātus. Jums nepieciešams:- piespiedu konvekcijas hidrauliskā krāsns,
- alumīnija svēršanas panna,
- vairākas Erlenmeijera kolbas,
- centrifūga vai laboratorijas filtrēšanas sistēma.
-
Pārbaudiet, vai raža atrodas Erlenmeijera kolbā. Ja tas tā nav, ielejiet to. Šajā eksperimenta posmā baktērijas joprojām atrodas kultūras buljonā. Viņi vēlāk tiks atdalīti. -
Nosusiniet svēršanas pannu. Šim nolūkam ievietojiet cepeškrāsnī. Jūs varat arī izmantot 47 mm diametra celulozes acetāta membrānas filtru ar 0,45 μm porām. Neatkarīgi no tā, kurš rīks tiek izmantots, precīzi izmēriet tā masu, lai to varētu atņemt no rezultātiem, kas iegūti, uzliekot ražu. -
Mix. Lerlenmeyer samaisiet, lai kultūra būtu viendabīga. Patiešām, smaguma dēļ šūnas dabiski mēdz nokrist trauka apakšā. Tātad jums ir mazliet jāsakrata, jo tas ir sadalīts vienādi un lai jūsu paraugs būtu reprezentatīvāks. -
Centrifūga. Izmantojot centrifūgu, baktērijas atdala no kultūras buljona. Šo ierīci izmanto konteinera un pretsvara pagriešanai ar ļoti lielu ātrumu. Buljons plūst, kas uztur tikai dzīvo vielu. Lai iegūtu vairāk informācijas, internetā atradīsit informāciju par centrifūgas lietošanu. -
Iegūstiet mīklu. Nometiet to uz svēršanas pannas. Jūs varat iemest kultūras buljonu, jums tas vairs nebūs vajadzīgs, bet turiet lerlenmeyer uz rokas. -
Noskalo centrifūgu. Papildus baktēriju šūnām uz svariem ielej skalošanas ūdeni. Rezultāts, kas iegūts visam, dod jums biomasu. -
Atrodiet sauso masu. Lai zinātu parauga sauso biomasu, novietojiet svēršanas pannu cepeškrāsnī, kas novietota 100 ° C temperatūrā uz 6 līdz 24 stundām, saskaņā ar instrukcijām, kas pievienotas ierīcei. Esiet piesardzīgs, lai nepārsniegtu šo temperatūru, lai nesadedzinātu baktērijas. Tad visu nosver, pēc tam atņem paplātes masu.
3. metode Turpināt ar turbidimetriju
-
Sagatavojiet savu aprīkojumu. Jums būs nepieciešams gaismas avots un spektrofotometrs, ierīce, kas atrodama lielākajā daļā zinātnes laboratoriju. Skatiet pievienoto lietotāja rokasgrāmatu, jo katram modelim ir sava darbība. Šī metode ir viena no visbiežāk izmantotajām baktēriju augšanas noteikšanai, jo tai nepieciešami tikai lēti un ērti lietojami rīki. -
Iedvesmojiet kultūru. Duļķainumu izmanto, lai novērtētu šķidruma saturu daļiņās, lai noteiktu, vai tas ir vairāk vai mazāk duļķains. Rezultāts, ko iegūsit no šī mērījuma, tiks parādīts NTU (vai nephelometriskās duļķainības vienības). Lai precīzi izmērītu parauga duļķainību, var būt nepieciešams veikt ierīces kalibrēšanu. -
Veikt piezīmes. Duļķainums ir baktēriju daudzums paraugā. Spektrofotometrs arī ļaus jums uzzināt šķīduma caurlaidību (% T), kura vērtība ir apgriezti proporcionāla duļķainumam. Pēc tam salīdziniet dažādos paraugos iegūtos rezultātus, lai izmērītu baktēriju augšanu.